紫外分(fēn)光光度儀常見使用(yòng)問題分(fēn)析(二)
故障:紫外分(fēn)光光度儀沒有(yǒu)任何檢測信号輸出
原因:沒有(yǒu)任何光束照射到樣品室内。
檢查:将波長(cháng)設定為(wèi)530nm,狹縫盡量開到寬檔位,在黑暗的環境下用(yòng)一張白紙放在樣品室光窗出口處,觀察白紙上有(yǒu)無綠光斑影像。
處置:檢查光源鏡是否轉到位,雙光束儀器的切光電(diàn)機是否轉動了(耳朵可(kě)以聽見電(diàn)機轉動的聲音)。
故障:長(cháng)時間段的負值或滿屏大噪聲
具(jù)體(tǐ)表現:做基線(xiàn)掃描或樣品掃描時,基線(xiàn)或信号有(yǒu)一個長(cháng)時間段的負值或滿屏大噪聲
原因:濾光片飼服電(diàn)機“失步”,造成檔位錯位,國(guó)産(chǎn)電(diàn)機尤甚。
檢查:重新(xīn)開機有(yǒu)可(kě)能(néng)回複,或打開單色器對照波長(cháng)與濾光片的相對位置來檢查(注意:打開單色器時要保護檢測器不被強光刺激)。
處置:更換飼服電(diàn)機;
故障:吸光值信号上下擺動
具(jù)體(tǐ)表現:當儀器波長(cháng)固定在某個波長(cháng)下時,吸光值信号上下擺動,特别是測量模式轉換為(wèi)按鍵開關式的簡易儀器。
原因:開關觸點因長(cháng)期氧化所緻造成接觸不良。
檢查:用(yòng)手加重力量按琴鍵時,吸光值随之變化。
處置:用(yòng)金屬活化劑清洗按鍵觸點即可(kě)。
故障:
紫外分(fēn)光光度儀噪聲較大
具(jù)體(tǐ)原因:樣品室放入空白後做基線(xiàn)記憶,噪聲較大,紫外區(qū)尤甚。
原因:比色皿表面或内壁被污染、使用(yòng)了玻璃比色皿或空白樣品對紫外光譜的吸收太強烈,使放大器超出了校正範圍。
檢查:将波長(cháng)設定為(wèi)250nm,先在不放任何物(wù)品的狀态下調零,然後将空比色皿插入樣品道一側,此時吸光值應小(xiǎo)于0.07Abs;如果大于此值,有(yǒu)可(kě)能(néng)是比色皿不幹淨或使用(yòng)了玻璃比色皿;同樣方法也可(kě)判斷空白溶液的吸光值大小(xiǎo)。
處置:更換比色皿;更換空白液
紫外分(fēn)光光度儀使用(yòng)注意
1.使用(yòng)的吸收池必須潔淨,并注意配對使用(yòng)。量瓶、移液管均應校正、洗淨後使用(yòng)。
2.取吸收池時,手指應拿(ná)毛玻璃面的兩側,裝(zhuāng)盛樣品以池體(tǐ)的4/5為(wèi)度,使用(yòng)揮發性溶液時應加蓋,透光面要用(yòng)擦鏡紙由上而下擦拭幹淨,檢視應無溶劑殘留。吸收池放入樣品室時應注意方向相同。用(yòng)後用(yòng)溶劑或水沖洗幹淨,晾幹防塵保存。
3.供試品溶液濃度除各該品種已有(yǒu)注明外,其吸收度以在0.3~0.7之間為(wèi)宜。
4.測定時除另有(yǒu)規定外,應以配制供試品溶液的同批溶劑為(wèi)空白對照,采用(yòng)1cm石英吸收池,在規定的吸收峰±2nm以内,測幾個點的吸收度或由儀器在規定的波長(cháng)附近自動掃描測定,以核對供試品的吸收峰位置是否正确,并以吸收度大的波長(cháng)作(zuò)為(wèi)測定波長(cháng),除另有(yǒu)規定外吸收度大波長(cháng)應在該品種項下規定的測定波長(cháng)±2nm以内。
5.供試品應取2份,如為(wèi)對照品比較法,對照品一般也應取2份。平行操作(zuò),每份結果對平均值的偏差應在±0.5%以内。
6.選用(yòng)
紫外分(fēn)光光度儀的狹縫寬度應小(xiǎo)于供試品吸收帶的半寬度,否則測得的吸收度值會偏低,狹縫寬度的選擇應以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為(wèi)準,對于大部分(fēn)被測品種,可(kě)以使用(yòng)2nm縫寬。