蛋白質(zhì)二級結構

在研究蛋白質(zhì)折疊，蛋白質(zhì)穩定性或酶活性時，蛋白質(zhì)二級結構是重要的考慮因素。

用(yòng)于監視二級結構的強大工(gōng)具(jù)是圓二色性（CD），它是左右圓偏振光的吸收差。由于蛋白質(zhì)由手性氨基酸組成，因此它們具(jù)有(yǒu)CD活性，并顯示出對CD的二級結構敏感的*CD光譜。該光譜可(kě)以提供蛋白質(zhì)結構的定性快照，或者可(kě)以使用(yòng)多(duō)種算法從遠(yuǎn)紫外CD光譜估算蛋白質(zhì)的二級結構組成，其中(zhōng)一些算法可(kě)在Olis GlobalWorks軟件中(zhōng)獲得。

蛋白質(zhì)二級結構也可(kě)用(yòng)于監測蛋白質(zhì)折疊和解折疊。平衡研究包括随溫度或化學(xué)變性劑增加而變化的CD光譜集合。随着蛋白質(zhì)的展開，CD光譜反映了這一點。在此變性過程中(zhōng)以單個波長(cháng)或全光譜掃描拟合數據可(kě)提供熱力學(xué)信息，例如熔融溫度和展開焓。這兩個參數都提供了有(yǒu)關所研究蛋白質(zhì)穩定性的重要信息。

在DSM 17， DSM 20，DSM 1000，和多(duō)掃描支持蛋白質(zhì)二級結構研究。CD 250 Peltier電(diàn)池座等附件為(wèi)進行這些實驗提供了一種便捷的方法。

停止流

蛋白質(zhì)折疊和展開的動力學(xué)可(kě)以通過使用(yòng)停止流附件進行監測。可(kě)以通過在停止流動反應過程中(zhōng)觀察信息波長(cháng)的CD信号來研究蛋白質(zhì)結構的毫秒(miǎo)變化。GlobalWorks還支持對這些動力學(xué)軌迹進行動力學(xué)分(fēn)析。

酶學(xué)

酶催化的機制對生物(wù)化學(xué)領域的許多(duō)研究人員而言很(hěn)重要。酶活性測量的常用(yòng)方法包括監測酶和底物(wù)溶液随時間變化的吸光度或熒光。随着反應的進行，吸光度或熒光的變化報告了産(chǎn)物(wù)濃度的增加。

穩态動力學(xué)

穩态動力學(xué)測量涉及在整個測量過程中(zhōng)監測酶/底物(wù)複合物(wù)在恒定濃度下表現出的吸光度或熒光變化。幾種Olis儀器支持穩态動力學(xué)的測量。這些包括諸如HPDA 8452，Cary 14，Cary 17， DW2，DW2000，DB620和RSM 1000的吸收模型，以及諸如DM 45和DM 245的熒光模型。

穩态前動力學(xué)

穩态前動力學(xué)涉及測量酶/底物(wù)複合物(wù)的形成。可(kě)以将停止流量附件添加到大多(duō)數此類儀器中(zhōng)。其他(tā)配件包括TLC 50，四格珀耳帖（Peltier）炮塔和自動酶測定儀。Olis CLARiTY室為(wèi)在高散射環境（例如全細胞或線(xiàn)粒體(tǐ)懸浮液中(zhōng)）中(zhōng)測量酶動力學(xué)提供了令人興奮的新(xīn)可(kě)能(néng)性。

DNA結構/構象

DNA的結構和構象是研究DNA與蛋白質(zhì)和其他(tā)DNA配體(tǐ)相互作(zuò)用(yòng)的重要考慮因素。确定DNA結構和構象的技(jì )術包括X射線(xiàn)晶體(tǐ)學(xué)，圓二色性（CD），熒光和紫外可(kě)見吸收光譜。除X射線(xiàn)晶體(tǐ)學(xué)外，所有(yǒu)這些技(jì )術均由Olis儀器提供支持。

圓二色性

DNA在200-250 nm區(qū)域表現出*的CD光譜，該光譜對DNA結構特别敏感。當添加擾動劑（例如溫度升高或DNA配體(tǐ)）時，CD光譜可(kě)用(yòng)于探測DNA結構。典型的實驗包括在溫度升高或将配體(tǐ)添加到樣品中(zhōng)的同時收集光譜。

所有(yǒu)Olis CD型号DSM 17，DSM 20，DSM 1000和Protein Machine都支持DNA的CD測量，并且包括諸如CD 250 Peltier溫控細胞架，用(yòng)于配體(tǐ)結合的自動滴定儀和用(yòng)于動力學(xué)研究的Stopped-Flow等附件。

熒光性

無論是直接來自DNA分(fēn)子還是來自外部探針，熒光都是闡明DNA結構信息的有(yǒu)價值的技(jì )術。發射最大值和熒光強度變化揭示了有(yǒu)關DNA結構完整性的信息。結合熒光探針在結合DNA後顯示出極大的熒光強度增強，并且也是有(yǒu)用(yòng)的DNA結構探針。熒光能(néng)量轉移（FRET），其中(zhōng)兩個具(jù)有(yǒu)重疊發射和激發光譜的探針連接到同一DNA分(fēn)子。從供體(tǐ)染料轉移到受體(tǐ)染料的能(néng)量是兩者之間距離的函數。因此，FRET探針可(kě)以成為(wèi)監測适當标記的DNA分(fēn)子經曆的結構變化的有(yǒu)價值的工(gōng)具(jù)。所有(yǒu)Olis Fluorescence型号DM 45，DM 245，SLM 8000，SPF-500，RSM 1000F和Cary熒光系統的理(lǐ)想配置是支持DNA的熒光研究。DSM 17，DSM 20和DSM 1000也可(kě)以配置用(yòng)于CD和熒光研究。

熒光各向異性

熒光各向異性是熒光探針遷移率的量度，也可(kě)用(yòng)于觀察DNA結構和構象。在該技(jì )術中(zhōng)，熒光探針被垂直偏振光激發，發射的偏振量與熒光壽命期間熒光探針的遷移率有(yǒu)關。快速移動的探針将*去極化（各向異性為(wèi)零），而較慢的探針（例如與DNA結合的探針）将保持部分(fēn)極化（非零各向異性）。Olis Polarization Toolbox附件為(wèi)任何Olis熒光計（SLM系列除外）增加了各向異性功能(néng)。其他(tā)有(yǒu)用(yòng)的附件包括TLC 50 Peltier池架，4池Peltier炮塔，自動滴定儀和Stopped-Flow。

紫外線(xiàn)吸收

DNA的紫外吸收光譜也揭示了有(yǒu)關DNA結構的重要信息。盡管由于結構差異而引起的變化通常很(hěn)小(xiǎo)，但是GlobalWorks中(zhōng)的Olis拟合算法甚至可(kě)以消除最小(xiǎo)的光譜變化。該RSM 1000， OLIS 14/17和HPDA 8452支持的紫外-可(kě)見吸收光譜的集合到探針DNA結構。有(yǒu)用(yòng)的附件包括TLC 40珀耳帖電(diàn)池固定器和停止流。

線(xiàn)粒體(tǐ)代謝(xiè)

光譜學(xué)的缺點之一，特别是影響吸收率的是光散射對測量的影響。高度散射的樣品将增加市場上絕大多(duō)數分(fēn)光光度計的表觀吸收率。儀器無法區(qū)分(fēn)散射光和吸收光。實際上，該僞影通常用(yòng)于通過測量600 nm的表觀吸光度來大緻定量細菌細胞培養物(wù)。

渾濁樣品

在1980年代，随着Aminco DW2和後來的DW2000的推出，部分(fēn)解決了這個問題。Olis仍然支持這些驚人的光學(xué)平台。但是，Olis現在通過CLARiTY系列儀器在該設計上居于**地位，該儀器具(jù)有(yǒu)在存在高散射介質(zhì)的情況下記錄真實吸收光譜的能(néng)力。Olis CLARiTY系列儀器非常适合監測線(xiàn)粒體(tǐ)懸浮液，整個細胞或其他(tā)高度散射環境中(zhōng)的吸光度變化。

CLARiTY系列産(chǎn)品包括RSM 1000，DM 245和DB 620光學(xué)平台。RSM 1000配置允許收集快速掃描，通常配置為(wèi)每秒(miǎo)最多(duō)測量100次掃描。DM 245和DB 620配置為(wèi)随時間進行單個波長(cháng)測量或用(yòng)于常規吸光度掃描。CLARiTY室包括磁力攪拌和25至80 C temperature的溫度控制。常用(yòng)附件包括TLC 50（用(yòng)于RSM 1000），StepDisk（用(yòng)于RSM 1000），Twin Peltier（用(yòng)于DW2 / 2000）和熒光模塊（用(yòng)于DW2 / 2000）。

化學(xué)動力學(xué)

反應動力學(xué)是實驗室和教室化學(xué)研究的重要組成部分(fēn)。動力學(xué)分(fēn)析的概念是許多(duō)本科(kē)化學(xué)課程的基礎，也是許多(duō)研究項目的基礎。Olis支持通過光譜學(xué)在紫外線(xiàn)，可(kě)見光或近紅外光譜區(qū)域内以微秒(miǎo)到小(xiǎo)時的時間範圍監視反應。動力學(xué)反應可(kě)以通過多(duō)種方法觸發，包括手動混合，停止流混合或快速光解。但是，可(kě)以由TTL信号啓動的任何觸發器都可(kě)以集成到Olis系統中(zhōng)。

吸光度和熒光

強大的Olis動力學(xué)系統是RSM 1000，可(kě)以輕松配置以用(yòng)于從深紫外到近紅外的任何波長(cháng)範圍。其獲得的ScanDisk技(jì )術支持每秒(miǎo)最多(duō)收集1000次光譜掃描。為(wèi)了以更适中(zhōng)的速率吸收光譜，HPDA 8452以高達10次掃描/秒(miǎo)的速度收集光譜掃描。RSM 1000，DB 620或HPDA 8452可(kě)用(yòng)于單波長(cháng)動态波長(cháng)。

的DM 45，DM 245，RSM 1000F，和SLM系列熒光計提供的能(néng)力來監控熒光反應為(wèi)好。

停流，閃光燈，LED，Peltier TLC 45，Peltier TLC 50和電(diàn)磁攪拌器是這些測量的常用(yòng)附件。